ПЛР – полімеразна ланцюгова реакція, яка використовується в молекулярній біології. За допомогою даного лабораторного дослідження надається можливість не тільки виявити наявність в організмі вірусу, а й визначити його тип і кількість. ПЛР на гепатит С широко використовується при діагностиці інфекційних захворювань шлунково-кишкового тракту (виразок, колітів, гепатитів і т. Д.).
Найбільше навантаження при розвитку хвороб шлунково-кишкового тракту відчуває печінку, яка здійснює детоксикацію організму. Вона виконує роль фільтра, виводячи з організму субстрати, надлишки яких призводять до інтоксикації і виникнення серйозних проблем зі здоров’ям.
Часто саме печінку піддається впливу вірусних захворювань, серед яких переважає гепатит. Якщо своєчасно його не виявили і не почати лікування, то це може привести до сумних наслідків, аж до летального результату. Тому при появі у людини симптомів гепатиту лікарі призначають аналіз ПЦР, який допомагає швидко діагностувати хворобу і виявити природу її походження.
аналіз ПЛР
Сьогодні діагностика гепатиту С відбувається за допомогою імунограми і біопсії печінки. Ці дослідження допомагають визначити антитіла в організмі, які призводять до ураження клітин печінки. Але ці методи не дозволяють визначити наявність хвороби на все 100%. Найбільш точну інформацію про наявність вірусу гепатиту С дає лабораторне дослідження ПЛР.
Цей аналіз проводиться в певних умовах, завдяки яким є можливість вибудувати ланцюг РНК в біологічному матеріалі. Відбувається це через те, що коли організм вражає вірус, його частинки все одно потрапляють в кров. І при їх з’єднанні зі спеціальними молекулами в певному середовищі починає вибудовуватися комплементарний вірусний РНК.
При його подальшому дослідженні вдається виявити вірус гепатиту С в організмі і процес руйнування печінки, якщо він почався. Роблять ПЛР тільки після того, як в крові пацієнта виявляються специфічні антитіла, які виробляються імунною системою при ураженні організму вірусом.
Як тільки аналіз ПЦР проводиться, на бланку вказується: РНК «виявлено» або «не виявлено». Однак в деяких ситуаціях вказується «недостатньо матеріалу», і тут потрібна повторна здача аналізу.
Якщо концентрація вірусних частинок в досліджуваному матеріалі менше мінімальної кількості, то це вказує на відсутність гепатиту С. Однак негативний результат на РНК може спостерігатися і тоді, коли організм піддався зовсім недавно зараження: частинок вірусу настільки мало, що тест-система їх просто не змогла виявити .
Якщо аналіз РНК позитивний, це свідчить про те, що кількість вірусних частинок в досліджуваному матеріалі перевищує нижній поріг, що вказує на наявність інфекційного процесу. Слід зазначити, що високі показники аналізу ПЛР вже є доказом розвитку хвороби і говорять про необхідність проведення лікування.
Аналіз ПЛР іноді може бути хибнопозитивних і псевдонегативних. Останній спостерігається тоді, коли в середовищі, в якій проводиться дослідження, знаходяться компоненти, що пригнічують утворення ланцюга РНК вірусу. В результаті цього не вдається своєчасно виявити гепатит, що призводить до його подальшого прогресування.
Вплинути на результат аналізу може гепарин, який знаходиться в крові пацієнтів. Також помилковий результат може бути наслідком недотримання умов транспортування біологічного матеріалу та його зберігання.
Помилковий позитивний результат аналізу ПЛР спостерігається в тому випадку, якщо біологічний матеріал був поміщений в забруднену пробірку або при наявності вірусу гепатиту в організмі, але іншого типу.
На якісність результату аналізу ПЛР може вплинути висока концентрація криоглобулинов в крові. Тому, щоб отримати більш точні відповіді, рекомендується перед аналізом здати кров на виявлення даної речовини. Це дозволить заздалегідь визначити можливі спотворення результатів аналізу.
Після того як якісний аналіз ПЦР буде зроблений і за підсумками дослідження в крові виявиться висока концентрація частинок вірусу, пацієнтові призначають специфічне лікування. Однак слід розуміти різницю між гепатитом В і гепатитом С. Якщо від першого є можливість вилікуватися, то від другого – немає. І найчастіше він вимагає пересадки печінки.
Кількісний аналіз ПЦР
Кількісний аналіз ПЦР дає можливість виявити частинки вірусу в крові і визначити ступінь ураження печінки. Це більш якісний аналіз, який дає достовірні результати. Підсумки дослідження виражаються в одиницях виміру: кількість копій на мл (копії / мл).
Кількісний аналіз ПЦР проводять перед тим, як починається лікувальна терапія. Потім його проводять кожні 10-14 днів, щоб стежити за ефективністю проведеного лікування. Оцінка на 12 тижні лікування є найбільш показовою.
Для проведення такого аналізу не потрібно якої-небудь спеціальної підготовки. Єдине, що необхідно зробити пацієнтові, це, природно, відязикатися від алкоголю і куріння за одну-дві години до взяття біологічного матеріалу. Для даного дослідження береться кров з вени.
У різних лабораторіях існують різні значення досліджень. У деяких використовуються копії / мл, а в деяких – МО / мл: 4 копії / мл дорівнюють 1 МО / мл.
Позитивним результат РНК вважається в тому випадку, якщо виремия перевищує 800 000 МО / мл або 3 000 000 копій / мл. Негативним відповідь є, коли дані показники не перевищують порогу 400 000 МО / мл.
При цьому в бланку аналізу підсумок проведеного дослідження може бути зазначений не в цифрах, а у вигляді значення: нижче, вище норми, не виявлено і т. Д. Значення «РНК нижче діапазону вимірювання» вказує на те, що частинки вірусу присутні в досліджуваному матеріалі , але в дуже маленьких кількостях. Якщо при подальших дослідженнях дані значення будуть зростати, це вже свідчить про прогресування хвороби.
Якщо в аналізі зазначено «РНК не виявлено», то це говорить про те, що вірус гепатиту С та інших його типів відсутній і людина здорова.
ПЛР – один з найбільш достовірних аналізів. За допомогою його можна не тільки виявити вже прогресуючий гепатит, але і початкову стадію його розвитку, що дозволяє своєчасно розпочати лікування і запобігти швидкий розвиток патології.