Аналіз на дизентерію

Гострі захворювання лікуються негайно. Аналіз на дизентерію повинен задовольняти критерієм швидкості. У дорослих і дітей фіксується і хронічна форма. Тоді проводиться аналіз калу на дизентерію. Можна це зробити в рамках аналізу складу мікрофлори, як при дисбактеріозі. Принцип вирощування аналогічний. Швидкий результат дає спостереження в мікроскоп.

Проблема здачі бактеріологічного аналізу в рівні достовірності – не перевищує 30-50%. Тому лікар керується клінічними симптомами. На дизентерію та сальмонельоз визначення зараження полягає в пильному огляді пофарбованої проби. Але кал не завжди дає сходи. Тоді на дизентерію беруть кров з метою виявлення антитіл. Проблема в формуванні імуноглобулінів із запізненням (3 дні) …

Що робити?

Недостатня точність лабораторних досліджень обумовлена характерною клінічною картиною дизентерії в гострих випадках. Виняток – синдром інтоксикації, що проявляється отруєнням. Бактеріологічне дослідження проводиться з:

  1. Кала.
  2. Блювотних мас (при наявності).

Метод висівання займає час, а дизентерія не триває довго. Проходить за тиждень. Цього вистачає, щоб палички дали сходи на живильному середовищі. Типовий протокол передбачає відведення п’ятиденного терміну на захід (invitro.ru/analizes/for-doctors/571/17420/).

У школі вчать: від кишкових інфекцій щодня помирає 2100 дітей. При вагітності мамі розповідають, як небезпечно не мити руки перед їжею. Точність результату невисока. Але посів залишається одним з варіантів.

Деякі методики лабораторного аналізу

Для зараження досить потрапляння всередину організму людини менше 100 бактерій. Діагностика здійснюється 2 методами:

  • бактеріологічними;
  • серологічним.

3-кратний бакпосеви шигели на живильне середовище при подальшому дослідженні дає точність діагнозу 40-60%. Експрес-аналіз кишкових інфекцій проводиться без виведення культур. Матеріал досліджується на наявність специфічних антигенів, токсинів. Проби беруть із сечі, слини, виділень ануса, крові. Застосовуються імунологічні методики, наділені підвищеною чутливістю і вибірковістю:

  • імуно-ферментний аналіз (ІФА);
  • иммунофлуоресценции (РІФ);
  • реакція аглютинації латексу (РАЛ);
  • полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР);
  • реакції коагглютинации (РКА).

Проблема полягає у випуску реактивів, індикаторів. Російськими підприємствами виготовляється спектр продукції для ідентифікації біопродуктів шигели Зонне.

Антитіла крові розпізнаються в реакції пасивної (непрямий) гемаглютинації. Методи лягли в основу дослідницьких наборів, які виявлятимуть шигели Флекснера, Флекснера-6, Зонне. В ході процесу досліджуються парні сироватки, взяті на початку захворювання і через 1 тиждень. Інше виконується відповідно до інструкції, що йде в комплекті. Позитивний результат зараховується при зміні щільності антитіл між пробами від 8 разів.

При спробах поставити етіологічний діагноз по гострої дизентерії на підставі 4-кратного зміни титру виникають систематичні помилки. Результат РИГА зіставляється з епідемічною обстановкою. Одночасно враховується передбачуваний термін захворювання, особливості перебігу. Титр не повинен бути нижче 1: 400. Недостатня чутливість обумовлює недоцільність використання методу для виявлення дизентерії.

При нетиповому розвитку захворювання лікар прописує візуальний огляд товстої кишки. Згідно стадіях розвитку захворювання виділяються зовнішні ознаки – катаральні, геморагічні, виразкові, некротичні, фіброзні. При хронічному перебігу часто фіксується атрофія епітеліального шару.

Іноді діагноз виставляється при допоміжному вивченні зовнішнього вигляду випорожнень. Розпізнають виражене ураження дистального відділу товстого кишечника за кількістю слизу (лейкоцитів). Виявлення еритроцитів говорить про наявність крововиливів.

бактеріологічний посів

Перевага бактеріологічного посіву у визначенні відповідного антибіотика. Вирощуються шигели – нерухомі (на відміну від ешерихій і сальмонел) грамнегативні палички довжиною 23 мікрон, шириною 0,6. Бактерії анаеробні, здатні існувати в кисневих середовищах.

Робиться від 3 проб. Такий аналіз в більшій частині випадків дає правильний результат. Для висівання підходить будь-яке середовище. Шигелла – універсальний мікроб. Штам утворює S-колонію, за винятком Зонне, розростається в R-колонії.

В процесі зростання не утворюються ферменти, середу кисла. Шигеллу Зонне відрізняють по здатності повільно розщеплювати сахарозу і лактозу. Інші штами розрізнити за біохімічними ознаками не представляється можливим. Для диференціації розглядаються експресовані на оболонці антигени. За структурою вони нагадують представлені на кишкових паличках. Шигели можуть утворювати з патогенними ешеріхіями асоціації.

Бакпосів вирощується кілька днів. Лабораторіям потрібно 5 діб. Призначається лікування – лікар керується клінічними проявами захворювання. Коштує задоволення від 700 рублів.

При зборі фекалій намагайтеся не захоплювати кров. При неможливості негайного висівання проба калу консервується в гліцеринової суміші, або розчині фосфорнокислий солей.

Біохімічний аналіз калу

У зарубіжній практиці усвідомили: чекати 5 днів небезпечно, враховуючи відсоток смертей (до 40%). Вчені шукають токсини Шига. Отрути виділяє навіть атиповий штам кишкової палички. При дизентерії досліджується кал на ознаки токсину.

Штам кишкової палички STEC – в науковому середовищі О157 – відповідальний за більшу частину епідемічних спалахів. У 2011 році привів до смерті 32 німців. На частку STEC припадає до третини випадків кишкових інфекцій. Шляхи зараження, клінічні ознаки нагадують дизентерію. Атипові штами кишкової палички мають значення.

Здавати кал потрібно на початку хвороби. В подальшому стає складно виявити токсин. Метод дослідження доповнює бакпосев, серологічний аналіз на антитіла. Для диференціації з кишковою паличкою застосовуються електрофорез. З метою ідентифікації токсинів Шига 1 і 2 використовується метод генного ПЛР копіювання.

Цитотоксин Шига виробляється переважно Shigella Dysenteriae. Вказане дослідження не завжди підходить для виявлення дизентерії.

серологічний аналіз

Через 3 дні організм починає позбавлятися від дизентерії. Імунна система формує антитіла (знаходяться в крові). В ході дослідження використовується реакція пасивної гемаглютинації. Метод додаткових при дизентерії – лабораторна перевірка негативного результату, виданого діагностикою за допомогою бакпосева. Серологічний аналіз хороший при запізнілому зверненні пацієнта до лікаря.

Антитіла в крові зникають через 2-3 роки. Спалах захворювання зареєстрована через значний проміжок часу. Мінус методики – складність виявлення дизентерії при затяжному характер. Щільність антитіл падає. В результаті відсоток тестів знижується до 40-30%. У початковій стадії дається правильна відповідь в дослідженні до 80% випадків.

Обходять проблему повторним збором аналізу:

  1. При зверненні пацієнта.
  2. Через тиждень.

Достовірність результату оцінюється за швидкістю зміни щільності антитіл в сироватці. Позитивний діагноз ставиться при восьмикратному зміні. Антигени з’являються в сечі – можуть фіксуватися відповідним аналізом.

шкірна проба

Токсичний шок викликає специфічного роду висипання на шкірі. В ослабленому хворобою організмі достатньо появи додатково вводиться речовини для спостереження реакції (гідролізат дизентерійних бактерій). Він у великій кількості містить потрібний токсин. Проба в кількості 0,1 мл вводиться під шкіру, протягом доби спостерігається реакція (як з Манту).

Загальна картина досліджень

На карантині лікарі займаються причиною виникнення ситуації. За минулі 3 століття більше вмирало від дизентерії бійців, ніж в період боїв. У період Першої світової війни сильно страждала німецька армія в Східній Африці. На 1000 солдатів доводилося 277 хворих на дизентерію. Кишкові інфекції – гроза майбутніх гітлерівців.

Крім крові, сечі і калу досліджується візуально задній прохід. Це копрологический метод. Бактеріологічне дослідження проводиться на основі:

  1. Продуктів, місцевої води – щоб встановити джерело зарази.
  2. Трупів пацієнтів.
  3. Промивних вод шлунка.

Матеріали зберігаються в холодильнику до доби. Для збору фекалій застосовується дерев’яна, скляна паличка. Під бактеріологічний посів беруться середовища Плоскірєва і Ендо (рідше Левіна). Підвищення сходів забезпечується добавками Левоміцетину, Синтоміцина. Селенітовий середовище використовується для підвищення продуктивності шигелл Зонне. Онаслужіт для висівання блювотних мас, промивних вод.

Штам вирощується при температурі 37 градусів Цельсія протягом 20 годин. На другий день колонії висівають на середовище Ресселя. Для диференціації використовується зовнішній вигляд штаму:

  1. Сходи шигелл безбарвні, м’які, правильної круглої форми, діаметром від 1 мм.
  2. Штам Зонне грубий на вигляд, з порізаним периметром.

Середовище Ресселя містить вуглеводи, зі зміни власного кольору дозволяє судити про засіяної мікрофлорі. Проводиться диференціація між штамами шигел Флекснера, атипової кишковою паличкою, сальмонелами. На третій день береться кров, починається оцінка результатів по живильних середовищ (зовнішній вигляд, колір). Кал містить багато бактерій. Вибираються штами за зовнішнім виглядом схожі на шигели, за активністю відносно вуглеводів. Штам Зонне розщеплює лактозу і сахарозу з утворенням кислого середовища, але процес повільний.

Пильна увага приділяється нерухомим паличок, що не розщеплює сечовину. Що стосується шигелл Зонне, вони ферментують лактозу повільно. Для остаточної диференціації штамів використовують інші поживні середовища: Гисса, Кліглера, мясопептонний агар, Сіммонса, Крістенсен. Амінокислоти деякими штамами розщеплюються до індолу.

Антитіла шукають за імунологічними реакцій, підфарбовують для спостереження під мікроскопом. Візуальне дослідження кишечника проводиться у вигляді додаткової міри, що дозволяє оцінити ступінь патогенних змін. Корисно візуальне спостереження калу.

Диференціація інших захворювань

Щоб призначати дизентерійний бактеріофаг, лікар повинен переконатися в діагнозі. Ціла група кишкових інфекцій дає аналогічні симптоми. Це сальмонельоз, холера, отруєння, діарея. Лікування і симптоми мало пов’язані між собою. Чільна роль відводиться анамнезу – що передувало захворюванню. Так вдається виявити фактори, що дозволяють думати на отруєння. Носійство бактерій перевіряється лабораторними дослідженнями.

вакцинація

Росіяни впевнені: щеплення від дизентерії – кращий засіб … Відомостей про це в світовому інтернеті немає. Дезінфекція може запобігти зараженню. Дизентерійні вакцини в стадії розробки. Є шанси випробування препаратів на росіянах.

Створення вакцини – можна вирішити завдання лабораторій світу. Вчені впевнені: небезпека дизентерії сильно зменшена, нові види тестів виявляють солідні цифри. Дослідження показують, що повторні захворювання на дизентерію зустрічаються рідше, ніж первинні. Це важіль, яким ВООЗ хочуть перевернути земну кулю.

Специфіка штамів чи дозволить створити єдині ліки на всі випадки життя. Медики сподіваються прищеплювати види окремо: Флекснера 2а, 3а, 6 і Зонне. Механізм щеплення вивчається на прикладі кератокон’юктивіти у морських свинок, запаленні легенів у мишей. Плануються дослідження на людях. Напрямки руху лабораторій:

  1. Ослаблені формаліном мертві клітини.
  2. Антигени.
  3. Глікокон’югат.